Die Elite-Armyeinheit G.I. Joe wird Opfer eines Anschlages, bei dem fast alle Soldaten getötet werden. Nur eine Handvoll Soldaten unter der Leitung von Captain Duke Hauser (Channing Tatum), darunter Roadblock (Dwayne Johnson), Firefly (Ray Stevenson) und Lady Jaye (Adrianne Palicki), kann sich retten und begibt sich auf die Suche nach den Auftraggebern des Anschlags. War er vielleicht Teil eines Komplotts, in welchen auch der Präsident involviert ist? Oder war es ein Anschlag des bösen Zartan (Arnold Vosloo)? Sicher ist lediglich, dass die Überlebenden niemandem mehr trauen können. Niemandem? - Doch! Dem muskelbepackten Soldaten Roadblock kommt ein Name in den Sinn, der ihnen auf jeden Fall helfen kann und wird: Joe Colton (Bruce Willis), derjenige, der einst die Eliteeinheit G.I. Joe gründete.

Klappentext
Und sie werden für ein abscheuliches Verbrechen verantwortlich gemacht. Die G.I. Joes haben sich deshalb einem alten Feind und einer neuen Bedrohung zu stellen. Denn die Terrororganisation Cobra unterminiert dieses Mal die eigene Regierung. Und letztlich bleibt nur ein einziger Ausweg: die Abrechnung. Roadblock (Dwayne Johnson) führt ein neues Team (mit Channing Tatum und Bruce Willis) in ein Blockbuster-Spektakel der Superlative randvoll mit explosiver Action, spektakulären Spezialeffekten und tödlichen Waffen aller Art.