Lieber EXPERIMENTATOR,wir präsentieren Ihnen hier das Grundlagenwissen sowie Tipps und Tricks für den Umgang mit Nucleinsäuren. Sie werden sofort merken, dass der Autor Lust und Frust der täglichen Laborroutine genau kennt.Aus dem Inhalt:Präparieren, Fällen, Konzentrieren und Reinigen von NucleinsäurenDas molekularbiologische Handwerkszeug (Restriktionsenzyme, Gele, Blotten)PCR (Polymerase-Kettenreaktion)RNA-Isolierung, -TranskriptionKlonierung von DNA-FragmentenDNA-Nachweis und -Analyse (Markierung von Sonden, Hybridisierung, Screening, Sequenzierung)Funktion von DNA-Sequenzen (Mutagenese, In-vitro-Translation, transgene Mäuse, Transgenexpression, Gentherapie, Genomik)Lieferantenverzeichnis.Dieses Laborhilfsbuch zeigt Auswege aus experimentellen Sackgassen und weckt ein Gespür für das richtige Experiment zur rechten Zeit. Die eingestreuten Faust-Zitate mögen Sie trösten, wenn Sie sich in stillen Momenten der Selbsterkenntnis fragen, warum Sie das alles überhaupt tun.
Diese Auflage wurde aktualisiert und um Abschnitte zu den Themen Elektrophorese, fluoreszierende Proteine und Karriereplanung in der Wissenschaft ergänzt.

Autorentext

Dr. Cornel Mülhardt. Geboren 1965. Biologie-Studium in Heidelberg und Hamburg. Wissenschaftl. Angestellter in Erlangen (Institut für Med. Biochemie). Seit 1998 tätig bei Hoffmann-La Roche (Basel) in der Forschungsrichtung Neurobiologie. Seit Mai 2001 Leiter der Biologielaboranten-Ausbildung.

Klappentext

Lieber EXPERIMENTATOR, wir präsentieren Ihnen hier das Grundlagenwissen sowie Tipps und Tricks für den Umgang mit Nucleinsäuren. Sie werden sofort merken, dass der Autor Lust und Frust der täglichen Laborroutine genau kennt.Aus dem Inhalt: - Präparieren, Fällen, Konzentrieren und Reinigen von Nucleinsäuren, - Das molekularbiologische Handwerkszeug (Restriktionsenzyme, Gele, Blotten), - PCR (Polymerase-Kettenreaktion), - RNA-Isolierung, - Transkription, - Klonierung von DNA-Fragmenten, - DNA-Nachweis und -Analyse (Markierung von Sonden, Hybridisierung, Screening, Sequenzierung), Modifikation und Funktionsanalyse von DNA-Sequenzen (Mutagenese, In-vitro-Translation, transgene Mäuse, Transgenexpression, Gentherapie, Genomik), Lieferantenverzeichnis.Protokoll-Sammlungen gibt es viele, aber wer erklärt einem, was sich hinter den Methoden verbirgt? Dieses Buch richtet sich an alle Experimentatoren, die molekularbiologische Versuche durchführen wollen und gerne nachvollziehen möchten, was sich in ihrem Reaktionsgefäß abspielt. Das ganze Spektrum der üblichen molekularbiologischen Methoden wird vorgestellt, kommentiert und Alternativen aufgezeigt. Und weil die Laborversuche nicht alles sind, findet sich auch noch ein Kapitel zum Thema Karriereplanung. Der lockere Ton wendet sich gleichermaßen an Studenten wie an BTAs und Laboranten, aber auch der alte Hase wird hier und dort noch etwas Neues entdecken. Die 6. Auflage wurde aktualisiert und um neue Entwicklungen in den Bereichen Sequenzierung und miRNA ergänzt.

Zusammenfassung
"(...) ein unschätzbarer Begleiter (...) In humoristischer Weise, höchst kompetent und plastisch werden state-of-the-art die Methoden der Molekularbiologie vorgestellt und vermittelt. (...) Wer sich einen realistischen Überblick über den Stand der Technik in der Molekularbiologie verschaffen will oder gar selber im Labor molekularbiologisch tätig werden (sein) möchte, muss dieses Buch lesen, chemikalienresistent einschlagen und ständig bei sich tragen!" (BioTec)

"Mit unzähligen Tipps, dem kompletten Grundlagenwissen sowieso pflastert Mühlhardt die beschwerlichen Wege von der Nukleinsäure zu deren Klonierung, Mutagenese, in vitro-Translation, (Transgen-) Expression, Gentherapie und mehr. Laborjournal (..) zeigt Auswege ausexperimentellen Sackgassen und weckt ein Gespür für das richtige Experiment zur rechten Zeit." (Bioworld)

Inhalt

1 Was ist denn "Molekularbiologie", bitteschön? 1.1 Das Substrat der Molekularbiologie, oder: Molli-World für Anfänger 1.2 Was brauche ich zum Arbeiten? 1.3 Sicherheit im Labor 2 Einige grundlegenden Methoden 2.1 Nucleinsäure ist gleich Nucleinsäure und auch wieder nicht 2.2 Methoden zur DNA-Präparation 2.3 Die Reinigung von Nucleinsäuren 2.4 Konzentrieren von Nucleinsäuren 2.5 Konzentrationsbestimmung von Nucleinsäurelösungen 3 Das Werkzeug 3.1 Restriktionsenzyme 3.2 Gele 3.3 Blotten 4 Die Polymerase-Kettenreaktion (PCR) 4.1 Die Standard-PCR 4.2 Neue Entwicklungen 4.3 Tipps zur Verbesserung der PCR 4.4 PCR-Anwendungen 5 RNA 5.1 Methoden der RNA-Isolierung 5.2 Methoden der mRNA-Isolierung 5.3 Reverse Transkription (cDNA-Synthese) 5.4 In-vitro-Transkription (RNA-Synthese) 5.5 Serial Analysis of Gene Expression (SAGE) 5.6 RNA-Interferenz (RNAi) 6 Die Klonierung von DNA-Fragmenten 6.1 Die Grundlagen des Klonierens 6.2 Mit welchen Vektoren klonieren? 6.3 Welche Bakterien? 6.4 Herstellen kompetenter Zellen und Transformation 6.5 Probleme beim Klonieren 6.6 Die Lagerung von Klonen 7 Wie man DNA aufspürt 7.1 Herstellung von Sonden 7.2 Hybridisierung 7.3 Nachweis der markierten DNA 7.4 Screenen von rekombinanten DNA-Banken 7.5 Two-hybrid system 7.6 Phage display 8 DNA-Analyse 8.1 Sequenzierung 8.2 Methoden zur Analyse von DNA auf Mutationen 9 Untersuchung der Funktion von DNA-Sequenzen 9.1 Untersuchung der Transkription in Geweben 9.2 Mutagenese 9.3 in-vitro-Translation 9.4 Expressionssysteme 9.5 Transgene Mäuse 9.6 Regulation der Transgenexpression 9.7 Gentherapie 9.8 Genomik 10 Tipps für die Karriereplanung, oder: Der ganz kleine Macchiavelli für Jungforscher 11 Zu guter Letzt 12 Anhang 12.1 Nützliche Tabellen 12.2 Standardlösungen 12.3 Glossar 13 Wer, was, wo? 13.1 Lieferanten / Adressen 13.2 Literatur